紅細(xì)胞裂解液

Red Blood Cell Lysis Solution

● 產(chǎn)品包裝：

● 產(chǎn)品簡介：

紅細(xì)胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也稱ACK Lysis Buffer，是一種用于從人或鼠等的血液或組織樣品中裂解并去除無細(xì)胞核紅細(xì)胞的溶液。

本裂解液經(jīng)過優(yōu)化配方，在裂解紅細(xì)胞的同時幾乎不損傷淋巴細(xì)胞(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。本裂解液的主要有效成分為氯化銨。本裂解液不適用于有細(xì)胞核紅細(xì)胞的裂解，例如鳥或禽類的紅細(xì)胞。

本產(chǎn)品已經(jīng)經(jīng)過過濾處理，溶液為澄清透明溶液。如果要使用該產(chǎn)品處理過的血液或組織細(xì)胞樣品用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合等細(xì)胞培養(yǎng)實驗，建議客戶將溶液經(jīng)過0.22 μm濾膜抽濾后使用。如果使用該產(chǎn)品處理的樣品進(jìn)行核酸或蛋白提取及常規(guī)分析測試，可以直接使用該產(chǎn)品。

● 保存及運輸：

4℃保存，一年有效；常溫運輸。

● 使用說明：

對于組織細(xì)胞樣品需要洗滌液的常規(guī)操作步驟：

1. 新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2. 加入3-5倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鐘。例如細(xì)胞沉淀的體積為1ml，則加入3-5ml的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。

3. 400-500g常溫離心5分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的些檢測。

5. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500g常溫離心2-3分鐘，棄上清?？稍僦貜?fù)1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。4℃離心效果更佳。

6. 根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計數(shù)等后續(xù)實驗。

 對于組織細(xì)胞樣品無需洗滌的快速操作步驟：

1. 新鮮組織經(jīng)過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當(dāng)方法分散成細(xì)胞懸液，離心棄上清。

2. 對于0.2ml細(xì)胞沉淀加入1ml紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鐘。本步驟在室溫或4度操作均可。

3. 加入15-20ml PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，混勻。

4. 400-500g常溫離心5分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

5. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的一些檢測。

6. 根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計數(shù)等后續(xù)實驗。

   說明：對于常規(guī)步驟，多一步洗滌過程中的離心，但可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大體積的離心管?？焖俨襟E少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。

對于血液樣品需要洗滌的常規(guī)操作步驟：

1. 取新鮮抗凝血，400-500g離心5分鐘，離心棄上清。

2. 加入6-10倍細(xì)胞體積的紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鐘。例如細(xì)胞沉淀的體積為1ml，則加入6-10ml的紅細(xì)胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。注意：對于鼠的血液，裂解1-2分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至4-5分鐘，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

3. 400-500g常溫離心5分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的一些檢測。

5. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，400-500g常溫離心2-3分鐘，棄上清。可再重復(fù)1次，共洗滌1-2次。洗滌液的用量通常應(yīng)至少為細(xì)胞沉淀體積的5倍。4℃離心效果更佳。

6. 根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計數(shù)等后續(xù)實驗。

   注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在第一步中不進(jìn)行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液，并在室溫或4℃裂解4-5分鐘。對于鼠的血液，裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10分鐘，但通常不宜超過15分鐘，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。后續(xù)步驟相同。

對于血液樣品無需洗滌的快速操作步驟：

1. 每1ml新鮮抗凝血中加入10ml紅細(xì)胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解4-5分鐘。本步驟在室溫或4度操作均可。注意：對于鼠的血液，裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10分鐘，但通常不宜超過15分鐘，并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。

2. 加入20-30ml PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，混勻。

3. 400-500g常溫離心5分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細(xì)胞不會影響后續(xù)的一些檢測。

5. 根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀后即可進(jìn)行計數(shù)等后續(xù)實驗。

   說明：對于常規(guī)步驟，多一步洗滌過程的離心，但可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大體積的離心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。