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ECL發(fā)光Marker II(22-154 kD)

ECL發(fā)光Marker II(22-154 kD)

產品編號:RTD6129

產品規(guī)格:20次

數量
價格 ¥300


ECL發(fā)光Marker II22-154 kD

                                                                                              

產品編號及規(guī)格:

RTD6129   20T(100 μl)

儲存、效期及運輸:

  -20保存,有效期12個月,濕冰運輸。

產品簡介:

   ECL發(fā)光Marker是一種新型可視的 Western Blot(蛋白免疫印跡法)蛋白標準,可在同一膜上實現(xiàn)與目的蛋白同時顯示,而無需任何附加步驟和額外的試劑。該產品由8 種高純度的重組蛋白和4 種預染重組蛋白組成,指示的蛋白質分子量大小為13-154 kD(~13、22、28、38、50、62、~70、78、113、~140,154 kD),其中~70 kD 為橙紅色預染條帶,~13 ,~28,~140 kD 為藍色預染條帶,方便動態(tài)觀察蛋白質電泳狀態(tài)或判斷蛋白質轉膜效果。22、28、38、50、62、78、113、154  kD 等8 種重組蛋白可以結合幾乎所有類型抗體,可與目的蛋白質同時結合抗體并經ECL顯色。

該產品為即用型,冰浴融解后即可使用。

使用說明:

1.ECL發(fā)光Marker徹底溶解后,混勻上樣(3-5 μl);

1.1:對于使用一抗為鼠源抗體建議取本產品5 μl進行蛋白電泳;對于使用一抗為兔源抗體可以降低上樣量至3 μl;建議初次使用本產品時可以根據自身的實驗條件和實驗習慣通過預實驗確定合適的上樣量,以獲得效果更佳的實驗圖片;

1.2:Marker為即用型,不能100℃加熱處理,否則會導致蛋白條帶發(fā)生降解或失去效果

2.待測蛋白樣品上樣;

3.常規(guī)聚丙烯酰胺凝膠電泳;

4.參照具體儀器說明,將蛋白轉移至合適的膜上;

5.參照目的蛋白抗體說明書,進行膜封閉、一抗孵育、二抗孵育及相應的膜洗滌;

6.化學發(fā)光檢測,具體方法參照相關產品說明。

實驗示例:




問題及解決:

 

問題

原因

解決方法

條帶弱或者沒有條帶

上樣量偏少

加大上樣量

轉膜不充分

優(yōu)化轉膜條件,或使用蛋白預染 Maker判斷轉膜效果

檢測系統(tǒng)所用試劑失效

確認使用的檢測試劑正常工作,優(yōu)化一抗、二抗及檢測底物的反應條件(濃度、溫度、時間)

抗體沒有有效結合 ECL發(fā)光 Marker

不同來源的抗體及其亞型與 ECL發(fā)光 Marker的結合效果差異明顯,請根據實驗具體情況加以選擇

條帶過亮呈彌散狀,甚至無法區(qū)分條帶

ECL發(fā)光 Marker上樣量偏多

減少上樣量

抗體濃度過高

降低一抗、二抗使用濃度,優(yōu)化抗體反應條件

 


 
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